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該如何使用大鼠肝星形細胞看完本篇你就知道了
發布時間:2022-02-14   點擊次數:115次
  大鼠肝星形細胞分離自正常大鼠肝臟組織,呈葡萄串狀。肝星形細胞是肝臟特有的間充質細胞,約占肝臟細胞總數的8%~13%。
 
  作為肝臟合成細胞外基質的主要細胞群,肝星形細胞不僅能分泌蛋白多糖、糖蛋白等細胞外基質成分,合成一定量的膠原酶以維持正常的基底膜結構,還能通過其突起的收縮參與肝竇的微循環調節。
 
  此外,肝星形細胞能通過合成肝細胞生長因子、胰島素樣生長因子、表皮生長因子等促進肝細胞增殖和肝再生。
 
  大鼠肝星形細胞使用方法:
 
  收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
 
  1. 取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩定細胞狀態。
 
  2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
 
  3. 細胞傳代
 
  1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;
 
  2) 添加0.125%消化液約1mL至培養瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養液終止消化;
 
  3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中培養;
 
  4) 待細胞完全貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養基。
 
  大鼠肝星形細胞注意事項:
 
  1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月
 
  2. 在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作
 
  3. 傳代培養過程中,消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態
 
  4. 建議收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態。
 
  5. 該細胞只可用于科研
 
  備注:由于實驗所用試劑與操作環境的不同,以上方法供各實驗室參考。
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